Información General

El bromuro de etidio (EtBr) o 3,8-Diamino-5-etil-6-fenilfenantridinio se utiliza comúnmente como un marcador no radiactivo para teñir ADN con el fin de identificar y visualizar bandas de ácidos nucleicos en electroforesis y otros métodos basados en gel para la separación de ácidos nucleicos. El EtBr es un polvo cristalino, no volátil, inodoro y de color rojo oscuro que es moderadamente soluble en agua. Este material fluoresce de color rojo anaranjado bajo luz ultravioleta (UV) y con mayor fluorescencia cuando se une al ADN de doble cadena. Aunque es una herramienta eficaz para la investigación genómica, sus propiedades peligrosas requieren un manejo y eliminación seguros especiales.

Salud y Seguridad

El EtBr es un potente mutágeno (puede causar daño genético) y moderadamente tóxico después de una exposición aguda. El EtBr puede absorberse a través de la piel, por lo que es importante evitar cualquier contacto directo con el químico. La forma de polvo se considera un irritante para las vías respiratorias superiores, los ojos y la piel. Aunque no hay evidencia en este momento de carcinogenicidad o teratogenicidad en humanos, este material debe considerarse como un posible carcinógeno o teratógeno. Se ha encontrado que algunas alternativas de tinción son menos mutagénicas y menos tóxicas que el EtBr. Si los datos toxicológicos son insuficientes o poco claros, la tinción debe manejarse de la misma manera que el EtBr. Algunas alternativas de tinción se suspenden en dimetilsulfóxido (DMSO), que tiene implicaciones para la salud, incluida una mayor absorción cutánea de compuestos orgánicos.

Buenas Prácticas de Laboratorio

Mantener buenas prácticas generales de trabajo en el laboratorio ayuda a reducir los riesgos de exposiciones peligrosas.

Trabaje en una campana de extracción cuando maneje polvos, cristales o soluciones, para prevenir la exposición por inhalación.

Use una bata de laboratorio, pantalones largos, zapatos cerrados, protección ocular (gafas de seguridad o gafas protectoras) y guantes de nitrilo o cloropreno cuando trabaje con EtBr. Deje las batas de laboratorio, los guantes y otros equipos de protección personal (EPP) en el laboratorio cuando termine su trabajo, para evitar la propagación de este u otros químicos fuera del laboratorio.

Proporcione capacitación en seguridad a los investigadores/usuarios sobre los peligros, el uso y los procedimientos adecuados de limpieza para el EtBr. Revise los procedimientos operativos estándar (SOP) relevantes para el trabajo, la hoja de datos de seguridad (SDS). Póngase en contacto con EH&S si su laboratorio no tiene actualmente un SOP aprobado para el uso de bromuro de etidio.

Transporte en contenedores secundarios y trabaje con pequeñas cantidades de EtBr para minimizar el riesgo de accidentes.

Es necesaria una limpieza cuidadosa cuando se trabaja con tintes de ADN. Delimite y restrinja el área en la que se pueden usar los tintes de ADN. Verifique otras áreas con luz UV en una habitación oscura y siga los procedimientos de descontaminación a continuación para superficies contaminadas.

Cuando se use una fuente de luz ultravioleta en procedimientos con EtBr, se requiere precaución adicional. Como regla general, evite exponer la piel y los ojos desprotegidos a fuentes intensas de UV. Si la luz UV está dirigida hacia arriba, use una pantalla facial protectora contra UV cuando esté cerca de la fuente. Para trabajos prolongados cerca de cajas de luz UV u otras fuentes intensas, puede ser útil envolver el extremo de las mangas de la bata de laboratorio con cinta adhesiva para evitar espacios donde la muñeca podría estar expuesta.

El bromuro de etidio debe almacenarse lejos de agentes oxidantes fuertes en un lugar fresco y seco, y el recipiente debe mantenerse intacto y bien cerrado.

Respuesta de Emergencia

Cuidado de los ojos: Si el EtBr entra en contacto con los ojos, lávelos inmediatamente con abundante agua fría o fresca durante al menos 15 minutos, preferiblemente en una estación de lavado de ojos de emergencia.

Cuidado de la piel: En caso de exposición de la piel, retire la ropa contaminada y lave inmediatamente el área afectada con jabón y abundante agua fría o fresca durante 15 minutos.

Si se ingiere o inhala: En caso de ingestión, busque atención médica inmediata. Si se inhala polvo de EtBr, muévase a una fuente de aire fresco.

Derrames: Todos los laboratorios deben tener un kit de derrames disponible y cualquier persona que lo use debe estar capacitada previamente.

Los derrames de soluciones de bromuro de etidio deben absorberse y el área debe descontaminarse con jabón y agua. Evite levantar polvo al limpiar derrames sólidos mezclándolos con agua y luego absorbiendo la solución. Todos los materiales de limpieza y absorbentes de derrames deben embolsarse o colocarse en un recipiente sellado con una etiqueta de residuos peligrosos. Solicite una recolección de residuos peligrosos a EH&S.

Algunas instalaciones usan una lámpara UV portátil para verificar la contaminación residual de bromuro de etidio después de la limpieza de un derrame. Se puede detectar una fluorescencia rojo anaranjada bajo longitudes de onda UV "largas" y "cortas". Los usuarios de las lámparas portátiles deben ser conscientes de que su capacidad para detectar pequeños derrames no está garantizada. La facilidad de detección depende de una variedad de factores, incluida la composición química de la muestra, la longitud de onda de la lámpara UV y la intensidad de la lámpara. El uso de una lámpara UV portátil para detectar rastros de bromuro de etidio puede servir como una verificación ocasional de las prácticas de laboratorio, pero no puede sustituir una buena limpieza y un control cuidadoso de la contaminación.